酵母细胞表达系统

日期:2016-07-26 / 人气: / 来源:未知

◎服务简介
    酵母表达系统是一种最经济高效的真核蛋白表达系统,可以成功实现胞内表达或是分泌表达,且其放大培养基相对廉价,培养条件要求不高,适宜工业放大。与哺乳动物细胞表达系统一样,酵母蛋白表达系统能够对所表达蛋白进行例如糖基化、酰基化、脂基化、磷酸基化等保证蛋白天然构象的修饰。可用于制备非常接近天然蛋白的具有高附加值的蛋白原料。
    世宸蛋白表达平台采用自行改造的高效分泌载体和宿主组合,可在最大程度上实现最高质量的蛋白表达;专利的Biobrick技术,可以实现高效体外构建任意拷贝的基因剂量,实现表达量的提高,成功用于工业菌种的改良优化。
◎服务流程

方案沟通  ⇒  接受订单    质粒构成   蛋白表达    蛋白纯化 ⇒   成果交付
◎客户提供
目的蛋白/基因序列;蛋白询价信息表,需详细填写涉及的内容,如附件1。
最终交付
蛋白纯品,纯度90%以上。
表达产物检测报告,包括测序报告、实验条件、蛋白表达、纯化图谱等。
◎服务内容及说明

服务名称 服务项目 服务内容 交付结果 服务结果
酵母蛋白表达服务经济型套餐 原核克隆 基因的获得 核酸电泳图片 2周
PCR扩增产物酶切连接到合适的载体
转化DH5a
重组质粒大量制备
线性化重组质粒
优化表达 电转化适宜的酵母宿主 酵母核酸电泳图 2-3周
从转化的平板上随机挑10株单菌落做PCR鉴定
表达及纯化 从PCR鉴定阳性菌落中选取一株做1L体系的放大表达 最终纯化产物SDS-PAGE及WB 1-2周
发酵液上清处理及一步纯化
纯化产物SDS—PAGE及WB 1L上清的纯化
 
 
 
 













服务名称     服务项目 服务内容 交付结果 服务结果
酵母蛋白表达服务标准型套餐 原核克隆 基因的获得 核酸电泳图片 2周
PCR扩增产物酶切连接到合适的载体
转化DH5a
重组质粒大量制备
线性化重组质粒
优化表达 电转化适宜的酵母宿主 酵母核酸电泳图 5-6周
用遗传霉素G418进行多拷贝子筛选
对多拷贝子克隆进行PCR鉴定
选取40株多拷贝子进行小量诱导表达 最终种子表达上清SDS-PAGE图
表达及纯化 选择表达情况最好的,根据客户需要放大表达 最终纯化产物SDS-PAGE及WB 1-2周
发酵液上清处理及一步纯化
纯化产物SDS-PAGE及WB 1L上清的纯化产物
专利的Biobrick技术用于酵母工业菌种改良优化 原核克隆 基因的获得 核酸电泳图片 2周
PCR扩增产物酶切连接到合适的载体
转化DH5a
重组质粒大量制备
专利的Biobrick技术体外梯度构建多拷贝基因剂量
优化表达 线性化重组质粒 酵母核酸电泳图 5-6周
电转化适宜的酵母宿主
对多拷贝子克隆进行PCR鉴定
选取40株多拷贝子进行小量诱导表达 最终种子表达上清SDS-PAGE图
表达及纯化
 
选择表达情况最好的,根据客户需要放大表达 最终纯化产物SDS-PAGE及WB 1-2周
发酵液上清处理及一步纯化
纯化产物SDS-PAGE及WB 客户要求的蛋白表达量
 
 






























咨询电话:0591-83300950

作者:admin


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